全自動(dòng)核酸提取儀常見的使用難題解答

更新時(shí)間：2021-09-22瀏覽：1643次

　　全自動(dòng)核酸提取儀采用磁棒吸附轉(zhuǎn)移核酸純化方式，利用深孔反應(yīng)板和磁棒套，搭配不同種類的磁珠法核酸提取試劑，同時(shí)操作1-96個(gè)樣本，從血液、細(xì)胞、組織、病毒等多種樣本中自動(dòng)分離提取純化DNA/RNA。儀器通過特制的磁棒吸附、轉(zhuǎn)移和釋放磁珠，從而實(shí)現(xiàn)樣本/磁珠/核酸的轉(zhuǎn)移，避免了液體處理過程，提高了自動(dòng)化程度。

　　全自動(dòng)核酸提取儀是針對(duì)紛繁復(fù)雜的樣本，每天的核酸提取可以說是費(fèi)時(shí)費(fèi)力的工作難題。如果短時(shí)間內(nèi)想穩(wěn)定拿到實(shí)驗(yàn)結(jié)果，那么快速、穩(wěn)定的核酸提取方法就顯得十分重要。

　　比較常見的提取方法有沉淀法，離心柱法和磁珠法，提取步驟基本類似分為裂解、洗滌和洗脫。

　　全自動(dòng)核酸提取儀需要注意的細(xì)節(jié)較多，一處出錯(cuò)都會(huì)導(dǎo)致結(jié)果的失敗。常見的問題主要有產(chǎn)物得率低，產(chǎn)物降解或者試劑殘留。針對(duì)這些問題，下文整理給出了具體的應(yīng)對(duì)方法，幫助大家避坑。

　　1、提取的核酸得率低：

　　樣品量與試劑的配比要控制在一定范圍，避免超過裂解能力；

　　破碎研磨的步驟處理細(xì)節(jié)很重要，一定要充分研磨，這是核酸提取的首要條件；

　　在洗脫的步驟，使用足量的洗脫液洗脫并充分混勻，避免有團(tuán)塊殘存；

　　實(shí)驗(yàn)耗材要匹配，如不同的吸附柱或磁珠的核酸吸附能力不同，也會(huì)影響核酸的得率。

　　2、提取核酸出現(xiàn)降解：

　　提取的樣品量要符合試劑的配比，盡量控制樣品量達(dá)到合適比例；

　　每個(gè)步驟都要注意充分的混合均勻，避免團(tuán)塊的殘留影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；

　　在洗脫時(shí)，時(shí)間過長(zhǎng)或者溫度過高，核酸有可能會(huì)降解；

　　樣本切記不可反復(fù)凍融，提取的樣本要注意在合適的溫度保存，長(zhǎng)期保存盡量-80℃。

　　3、提取到的核酸純度不夠高，甚至抑制物殘留影響下游實(shí)驗(yàn)：

　　樣本量和裂解液等試劑的配比要盡量控制到合適的范圍；