組織研磨低溫均質(zhì)儀推出至今，越來越多用戶體驗(yàn)了其在組織DNA提取中相對(duì)于手工研磨的方便性及高效性，組織研磨低溫均質(zhì)儀與手工液氮法研磨后的新鮮組織樣本在DNA提取、RNA提取性能方面的差異，評(píng)估均質(zhì)儀的適用性。

 

　　將10例FT樣本分別用吸水紙吸干表面的水分后，稱重后分裝為2管/例，20mg±0.3mg/管。向離心管內(nèi)加入300μl裂解液。將離心管放于液氮中，冷凍處理。

 

　　液氮冷凍處理后的離心管固定于組織研磨低溫均質(zhì)儀適配器中，向離心管中加入2粒3mm磁珠。小心將適配器正確安裝至均質(zhì)儀上，設(shè)置研磨參數(shù)：5輪循環(huán)數(shù)，60s/輪，10s間隔。啟動(dòng)儀器，研磨組織。研磨后，再向離心管中加入300μl裂解液（裂解液總使用量為600μl）。

 

　　取樣本放于研缽中，加入液氮后迅速研磨。將組織粉末轉(zhuǎn)移至離心管中，稱重后向其中加入600μl裂解液。將上述分別使用兩種研磨方法處理后的樣本，使用DNARNA共提試劑盒同時(shí)提取DNA和RNA。使用微量分光光度計(jì)測(cè)定DNA、RNA的濃度及純度。DNA提取后于-20℃保存，RNA于-80℃保存。

 

　　均質(zhì)儀處理與手工液氮研磨處理后提取FT的DNA、RNA在濃度、純度上均無顯著性差異（成對(duì)檢驗(yàn)P>0.05）。但手工研磨有較大的樣本損失率，對(duì)于DNA提取濃度較低的樣品來說，均質(zhì)儀可以做到樣品0損失，在DNA提取上有著明顯的優(yōu)勢(shì)，且手工處理的過程復(fù)雜、易交叉污染，操作所用時(shí)間等方面均不及均質(zhì)儀，因此均質(zhì)儀對(duì)于DNA提取工作相對(duì)于手工研磨處理有很大優(yōu)勢(shì)。